产抑李斯特细菌素乳酸菌的筛选及其细菌素的研究

【摘要】单核细胞增生李斯特氏菌（Listeriamonocytogenes）是一种适应性很强的、能引起严重的食源性疾病的致病菌，可引起脑膜炎、败血症和流产。乳酸菌细菌素是一种由乳酸菌代谢产生的有杀菌或抑菌作用的小分子肽或蛋白质类物质，具有高效、无毒、无残留、不产生耐药性等特点，已经成为食品防腐剂研究重点，同时被认为是最有希望代替抗生素的天然产物。采用双层琼脂扩散法，以L.monocytogenes为指示菌，在排除过氧化氢和有机酸的基础上，从传统发酵酸黄瓜中分离的200株乳酸菌中筛选到一株发酵上清液对指示菌有抑制作用的菌株ZLG85。通过胃蛋白酶、胰蛋白酶和中性蛋白酶降解实验，确定了抑菌物质的细菌素本质。通过形态、生理生化实验和16SrDNA序列分析，将菌株ZLG85鉴定为肠膜明串珠菌肠膜亚种。对肠膜明串珠菌素ZLG85（MesentericinZLG85）进行了分离纯化及分子量测定。采用80%体积比的冷乙醇沉淀进行细菌素粗提取。使用葡聚糖凝胶SephadexG-25对细菌素进行凝胶层析，上样量3mL，洗脱剂洗脱速度0.8mL/min。纯化后，细菌素纯化倍数为25.37，效价为60185AU/mL。通过N-羟甲基甲基甘氨酸（Tricine）-SDS-PAGE凝胶电泳测得细菌素的分子量为2.5kDa。对MesentericinZLG85的抗菌谱进行研究，结果表明mesentericinZLG85除了能较好的抑制L.monocytogenes的生长外，还能抑制金黄色葡萄球菌、藤黄八叠球菌、枯草芽孢杆菌、甲型副伤寒沙门氏菌、痢疾志贺氏菌等的生长。MesentericinZLG85具有良好的热稳定性，较强的酸碱稳定性，对木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶以及胰蛋白酶均很敏感，K+、Na+、Mg2+、Ca2+、Zn2+对其抑菌活性影响显著（P<0.05），有机溶剂对其活性的影响不显著（P>0.05）。MesentericinZLG85的分子量和抗菌谱不同于目前已知的明串珠菌素，是一种新型广谱的肠膜明串珠菌素。
【作者】朱传胜；
【导师】高玉荣；
【作者基本信息】黑龙江八一农垦大学，食品科学，2014，硕士
【关键词】肠膜明串珠菌素；筛选鉴定；分离纯化；生物稳定；

【参考文献】
[1]林小驰,宋小华,姜国华.数据库与中国会计·金融实证研究首届论坛综述[J].中国会计评论,2005,02:427-430.
[2]龚兰燕.钩编针织物组织结构与仿真研究[D].武汉纺织大学,纺织材料与纺织品设计,2014,硕士.
[3]高海军,俞国军,李振龙.基于agent的城市交通信号控制[J].控制与决策,2004,07:737-740.
[4]庄玉良.基于数据仓库的煤炭企业物资管理系统研究[J].煤炭经济研究,2005,06:43-45.
[5]杨宏兵.6-SPS并联机器人运动学及工作空间的仿真研究[D].合肥工业大学,机械电子工程,2004,硕士.
[6]朱婷婷.“五四”启蒙语境下女性关系的文学书写[D].山东师范大学,中国现当代文学,2013,硕士.
[7]樊金柱.双螺旋直旋作动器设计与仿真分析[D].南京航空航天大学,机械设计及理论,2013,硕士.
[8]王雪.基于DEA的我国文化产业上市企业融资效率评价研究[D].西安外国语大学,区域经济学,2014,硕士.
[9]王爽.新闻发布会汉英交替传译中文化因素翻译的归化异化分析[D].外交学院,翻译,2014,硕士.
[10]詹晓燕.多晶硅—光伏系统全生命周期碳排放研究[D].扬州大学,环境科学,2011,硕士.
[11]曹召丹.豫西煤田地质构造特征及其对瓦斯赋存的控制[D].中国矿业大学,安全技术及工程,2014,硕士.
[12]潘颐聪.D-二聚体的监测对评估急性期下肢深静脉血栓的疗效及预后的作用[D].广西医科大学,外科学（专业学位）,2013,硕士.
[13]姜洁.从功能派的角度探析公示语的翻译[D].西安电子科技大学,外国语言学及应用语言学,2012,硕士.
[14]薛振江.基于C/S架构的企业人事管理系统设计与实现[D].山东大学,软件工程（专业学位）,2013,硕士.
[15]徐恺.基于用户心智模型的智能厨电操作界面可用性研究[D].浙江工业大学,2013.
[16]刘念武,龚晓南,俞峰,房凯.内支撑结构基坑的空间效应及影响因素分析[J].岩土力学,2014,08:2293-2298+2306.
[17]陈慧.姜黄汤对银屑病皮损中CD45RO、VEGF和iNOS表达的影响[D].青岛大学,皮肤性病学,2004,硕士.
[18]高红萍.剪切波的性质分析及其应用[D].北方工业大学,应用数学,2013,硕士.
[19]李克敏.颗粒增强铜基自润滑材料的制备及其载流摩擦磨损性能研究[D].河南科技大学,材料学,2014,硕士.
[20]石仁委.实施科学管理规范监督行为[J].胜利油田党校学报.2002(02)
[21]黄东.Pd-Co_3O_4/CNTs的制备及其在甲醇电催化氧化中的应用[D].北京化工大学,2013.
[22]马坤.国产化妆品品牌名称的特点及其问题探究[D].曲阜师范大学,语言学及应用语言学,2013,硕士.
[23]赵磊.股权结构、高管激励对公司绩效影响的实证研究[D].山东大学,企业管理,2013,硕士.
[24]吴兢.就中医情志对原发性血脂异常患者证素分布及与血脂指标相关性研究[D].北京中医药大学,中医内科学,2013,硕士.
[25]吕慧.二氧化钛基复合光催化剂的制备及其性能研究[D].华东理工大学,材料科学与工程,2014,硕士.
[26]孙健.基于衔接理论的英语国家留学生词汇衔接偏误研究[D].山东大学,汉语国际教育（专业学位）,2012,硕士.
[27]王芳.中学信息技术教师专业发展高原期的成因及对策研究[D].首都师范大学,现代教育技术,2014,硕士.
[28]尹初元.补肾舒脊颗粒治疗强直性脊柱炎髋关节病变临床研究[D].北京中医药大学,中医内科学,2013,硕士.
[29]刘云龙.基于Baker变换和广义异或运算的混合域图像加密[D].哈尔滨工业大学,光学,2013,硕士.
[30]万秀芝.流动性黑洞的形成机制及其实证分析[D].浙江工商大学,金融学,2013,硕士.
[31]杨勇虎,钟骏杰,范世东,姚玉南.模糊数据挖掘技术在交通量预测中的应用[J].计算机工程,2003,09:78-79+95.
[32]韩国圣.经济全球化背景下中国旅行社企业空间扩张模式的实证研究[D].上海师范大学,人文地理学,2004,硕士.
[33]赵向鹏.北京市业余体校女子篮球队训练现状及研究[D].首都体育学院,体育教育训练学,2013,硕士.
[34]张娜.金属氧化物在质子交换膜燃料电池催化剂中的应用研究[D].哈尔滨工业大学,2011.
[35]黄强.基于Zigbee的校园照明监控系统设计与实现[D].西南交通大学,控制理论与控制工程,2014,硕士.
[36]苟小军.磁-电-弹性层状复合材料多耦合场力学行为的研究[D].兰州大学,固体力学,2013,硕士.
[37]刘学丽.国库集中支付动态监控体系研究[D].山东大学,工业工程（专业学位）,2012,硕士.
[38]李定国.丛生竹纤维的预处理及酶解发酵产乙醇[D].中南林业科技大学,生物化学与分子生物学,2013,硕士.
[39]王跃.基于训练序列的OFDM系统定时同步技术研究[D].吉林大学,信号与信息处理,2014,硕士.
[40]樊丹.高中生语篇能力与英语阅读理解的相关性研究[D].沈阳师范大学,外国语言学及应用语言学,2013,硕士.
[41]张冰瑶.中国农业巨灾保险制度研究[D].辽宁大学,保险学,2012,硕士.
[42]徐仲达,何仁汉,孙波,唐宗璜.54°三分量检波器极性反转对地震记录的影响[J].石油地球物理勘探,1995,04:518-522+572.
[43]王楠.基于企业内部管理需求的企业价值评估研究[D].长安大学,企业管理,2014,硕士.
[44]卢平,袁亮,程桦,薛俊华,刘泽功,童云飞,王永,蔡如法,邓中.低透气性煤层群高瓦斯采煤工作面强化抽采卸压瓦斯机理及试验[J].煤炭学报,2010,04:580-585.
[45]张大为.竞技篮球比赛制胜因素的分析研究[D].湖南师范大学,运动训练（专业学位）,2014,硕士.
[46]吴鑫.数据挖掘技术在JSBAS系统构建和大客户分析中的应用[D].南京航空航天大学,2004.
[47]聂青.论析挪威的疑欧主义[D].上海师范大学,国际政治,2013,硕士.
[48]郑利锋.高新技术企业研发工作特征、胜任特征与绩效关系研究[D].浙江大学,2007.
[49]任艳杰.高糖环境下脂联素对人肾小管上皮细胞凋亡率及Bax、Bcl-2表达的影响[D].山西医科大学,内科学,2013,硕士.
[50]孙元华.基于编码识别技术的自动定位系统的研究与应用[J].冶金自动化,2011,03:51-54.